CO2培养箱是通过在培养箱箱体内模拟形成一个类似细胞/组织在生物体内的生长环境，培养箱要求稳定的温度（37℃）、稳定的CO2水平（5%）、恒定的酸碱度（pH值：7.2~7.4）、较高的相对饱和湿度（95%），来对细胞/组织进行体外培养的一种装置。
（1）定期检查超温安全装置,以防超温。方法为按进监测报警按扭,转动固定螺丝，直到超温报警装置响,然后关闭超温安全灯。
（2）所加入的水必须是蒸馏水或无离子水，防止矿物质储积在水箱内产生腐蚀作用。每年必须换一次水，经常检查箱内水是否够。
（3）箱内应定期用消毒液擦洗消毒，搁板可取出清洗消毒，防止其它微生物污染，导致实验失败。　
（4）如长期不使用二氧化碳时，应将CO2开关关闭,防止CO2调节器失灵。
（5）所使用的CO2必须的纯净的，否则降低CO2传感器的灵敏度和污染CO2过滤装置。　　　　
（6）二氧化碳培养箱应由专人负责管理，操作盘上的任何开关和调节旋扭一旦固定后，不要随意扭动，以免影响箱内温度，CO2、湿度的波动,同时降低机器的灵敏度。
（7）在无湿度控制的培养箱内，为保持箱内CO2的稳定，要在箱内底层放入一个盛水的容器。另外还有一种三气培养箱，该培养箱是在二氧化碳培养箱的基础上进一步改进的新产品。其原理同其它培养箱一样，特点在于不仅可加入CO2，还可加入氮气和氧气，并全部由电脑控制和调节各种不同气体的含量。主要用于一些特殊微生物的繁殖和培养，一般应用不广泛，目前只有国外的少数厂家生产。