第一步：输掖泵的选择:输液泵是HPLC系统中最重要的部件之一。

泵的性能好坏直接影响到整个系统的质量和分析结果的可*性。

输液泵应具备如下性能：

①流量稳定，其RSD应<0.5%，这对定性定量的准确性至关重要;

②流量范围宽，分析型应在0.1~10 ml/min范围内连续可调，制备型应能达100 ml/min;

③输出压力高，一般应能达到150~300 kg/cm2;

④液缸容积小;

⑤密封性能好，耐腐蚀。

泵的种类很多，按输液性质可分为恒压泵和恒流泵。

恒流泵按结构又可分为螺旋注射泵、柱塞往复泵和隔膜往复泵。恒压泵受柱阻影响，流量不稳定;螺旋泵缸体太大，这两种泵已被淘汰。目前应用最多的是柱塞往复泵。柱塞往复泵的液缸容积小，可至0.1ml，因此易于清洗和更换流动相，特别适合于再循环和梯度洗脱;改变电机转速能方便地调节流量，流量不受柱阻影响;泵压可达400 kg/cm2。其主要缺点是输出的脉冲性较大，现多采用双泵系统来克服。双泵按连接方式可分为并联式和串联式，一般说来并联泵的流量重现性较好(RSD为 0.1%左右，串联泵为0.2~0.3%)，但出故障的机会较多(因多一单向阀)，价格也较贵。

第二步：进样器的选择: 早期使用隔膜和停流进样器，装在色谱柱入口处。

现在大都使用六通进样阀或自动进样器。

进样装置要求：密封性好，死体积小，重复性好，保证中心进样，进样时对色谱系统的压力、流量影响小。HPLC进样方式可分为：隔膜进样、停流进样、阀进样、自动进样。

1.隔膜进样。用微量注射器将样品注入专门设计的与色谱柱相连的进样头内，可把样品直接送到柱头填充床的中心，死体积几乎等于零，可以获得最佳的柱效，且价格便宜，操作方便。但不能在高压下使用(如10MPa以上);此外隔膜容易吸附样品产生记忆效应，使进样重复性只能达到1~2%;加之能耐各种溶剂的橡皮不易找到，常规分析使用受到限制。

2.停流进样。可避免在高压下进样。但在HPLC中由于隔膜的污染，停泵或重新启动时往往会出现“鬼峰”;另一缺点是保留时间不准。在以峰的始末信号控制馏分收集的制备色谱中，效果较好。

3.阀进样。一般HPLC分析常用六通进样阀(以美国Rheodyne 公司的7725和7725i型最常见)，其关键部件由圆形密封垫(转子)和固定底座(定子)组成。由于阀接头和连接管死体积的存在，柱效率低于隔膜进样(约下降5~10%左右)，但耐高压(35~40MPa)，进样量准确，重复性好(0.5%)，操作方便。

4.自动进样。用于大量样品的常规分析。