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看完这篇文章,你真的懂自己的移液器吗?
[2020/7/7]
液器是实验室的必备常规设备,是每一位科研工作者,特别是生物、药物、化学等行业科研工作者每天都使用的工具,它的耐用性和精确度是大部分使用者最关心的,为了帮助大家选择适合的移液器、正确使用移液器、延长移液器使用寿命、确保移液精度,此文从介绍移液器最基础的知识开始,希望对大家有所帮助。
1
工作原理
移液器的工作原理:活塞通过弹簧的伸缩运动来实现吸液和放液。
2
结构
一般包括控制按钮(不同厂家设计不同,通常也通过此按钮进行吸液体积调解)、吸头推卸按钮、体积显示窗、套筒、弹性吸嘴、吸头。
3
移液模式
随着移液操作的广泛应用,可移取液体范围不断扩大,对精度要求越来越高,目前主要有2种移液器技术,以满足不同液体精确移液的需求:
一)内置活塞式移液模式
适用于常规移液操作。活塞位于移液器套筒内,液体与活塞之间有一段空气隔离,活塞与液体不接触。这是实验室最常见的移液器,使用时需注意不要让样品污染活塞,否则会造成样品的交叉污染。
内置活塞式移液模式
1、优点:
吸头一般通用;准确度更高、重复性更好;可设置成多同通道,进行高通量的移液;操作人员即学即会,无需熟练等
2、缺点:
不适宜移取高粘稠度液体、挥发性较大的液体、易发生交叉污染、错误的使用习惯易造成移液器精度不准甚至移液器内部腐蚀等。
二)外置活塞式移液模式
适用于操作高粘度液体。活塞位于移液器套筒外,位于吸嘴内部,活塞与液体之间没有空气段,活塞为一次性的,对于粘稠度较大的液体,也能实现精确移液,由于无空气间隔,避免了样品于空气接触可能发生的气雾交叉污染,因此也非常适合是珍贵的试剂、生物样品的移取。
外置活塞式移液模式
4
分类
1、按调节方式分
可调量程、固定量程
2、按操作方式分
手动移液器、电动移液器(移液工作站是一种功能更多的移液器,另文阐述)
3、按通道数分
单道、8道、12道
4、按灭菌方式分
半支灭菌:管嘴连接部件下半支高温灭菌
整支灭菌:无需拆卸,整支消毒、精度高、寿命长
5、特殊的移液器
(1)瓶口分液器:
工作原理也是平滑和精密的活塞上下滑动。
瓶口分液器是实验当中最常见的一种仪器装备,适用一般酸碱和低浓度的强酸强碱以及盐类。它能够进行精确的、高重复性的分液操作,而不浪费试剂,同时给操作人员和实验环境提供安全保证。
瓶口分液器分为三种,分别为基础型、有机型和氢氟酸型,基本已经覆盖了实验室所有的溶剂。基础型适用于比较广泛的试剂,包括一般的酸碱盐溶液,较低浓度的非氧化型强酸强碱和极性有机溶剂(不含非极性有机溶剂和卤代烃等),如H3PO4、HCl、H2SO4、NaOH、NaCl等。
有机型适用于广泛的有机溶剂和较高浓度的强酸溶液,如;含氯含氟的有机溶剂、三氟乙酸、四氢呋喃、过氧化物、氯仿、HNO3等。
氢氟酸型,仅适用于HF溶液。由于HF腐蚀玻璃,因此分配器的活塞为陶瓷活塞。
瓶口分液器通过螺口阀固定于试剂瓶上,闭合紧密稳固,使溶液的移取过程处于一个封闭系统中,避免了溶液的挥发、飞溅、翻倒等,降低了对环境和人的危害,相比量筒式完全开放的移液过程安全的多。在有机合成或者石油化工的实验室,高粘度、高密度、高挥发性溶剂并不少见,尤其是石化行业。此类溶液由于其特殊属性,难以快速移取,且用传统的量筒很难进行准确定量。瓶口分液器是完全可以胜任此类溶液的移取的。
也适用于大体量液体的分配,适用于需要反复吸取同一样液体。更换液体时要注意专业的清洗。
(2)助吸器
电动助吸器
手动助吸器
早期手段:洗耳球。
助吸器又名移液管控制器,大容量移液器等等。大致可分为电动助吸器和手动助吸器两种。
5
选择
1、性能:准确性和重复性
主要依据制造厂商提供的技术数据,购买后最好对数据进行验证。
2、耐用性/维护:移液器使用寿命长,仅需要很少的维护或维护成本低,这主要取决于移液器所用的材料。对于外壳,应当有较高的耐冲击性、耐腐蚀性和较低的导热性(如PVDF材质);对于活塞,目前市场上主要有不锈钢、陶瓷和塑料三种材质。不锈钢机械性能好、寿命长,只是不太适合用于强酸强碱的移液;陶瓷则有很高的耐腐蚀性,但机械性能较差。当然,优质的材料往往意味着更高的价格,所以需要综合考虑购买价格和寿命的因素。
3、 符合人体工程学原理: 手感舒适,吸排液操作力轻,避免重复性肌劳损,退吸头力小,主要考虑以下几点:第一,完成一个移液循环拇指的移动距离短,意味着舒适度更高;第二,比较相同量程的移液器完成一次排液(一定要按到底)所需的拇指用力,这是影响舒适性的关键,用力越少意味着长期使用造成手指损伤的风险越小;第三,装卸吸头,同样是越省力越好;第四,移液器的重量适中,过重会增加手的负担,但过轻也往往意味着材质可能差强人意;第五,其它的辅助设计,如壳体的磨砂设计以及指钩设计,有助于进一步提高舒适性。
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一个完整的移液循环
1、吸头安装
正确的安装方法是把白套筒顶端插入吸头, 在轻轻用力下压的同时 , 把手中的移液器按逆时针方向旋转180度 。切记用力不能过猛 ,更不能采取剁吸头的方法来进行安装 , 这样操作会导致吸头变形而影响精度,严重的则会损坏移液器,所以应当避免出现这样的操作。
2、容量设定
在容量设定时 ,有一个需要特别注意的地方 。当我们从大值调整到小值时,刚好就行;但从小值调整到大值时 ,就需要调超三分之一圈后再返回 ,这是因为计数器里面有一定的空隙 ,需要弥补。
3、预洗吸头
在我们安装了新的吸头或增大了容量值以后,应该把需要转移的液体吸取 、排放两到三次 ,这样做是为了让吸头内壁形成一道同质液膜, 确保移液工作的精度和准度, 使整个移液过程具有极高的重现性。其次, 在吸取有机溶剂或高挥发液体时, 挥发性气体会在白套筒室内形成负压 , 从而产生漏液的情况, 这时就需要我们预洗四到六次 ,让白套筒室内的气体达到饱和 ,负压就会自动消失。
4、吸液
先将移液器排放按钮按至第一停点 , 再将吸头垂直浸入液面 , 浸入的深度为:P2、P10小于或等于1mm, P20、P100、P200小于或等于2mm, P1000小于或等于3mm, P5ML、P10ML小于或等于4mm(浸入过深的话 ,液压会对吸液的精确度产生一定的影响,当然 ,具体的浸入深度还应根据盛放液体的容器大小灵活掌握 ),平稳松开按钮,切记不能过快。
5、放液
放液时 ,吸头紧贴容器壁, 先将排放按钮按至第一停点 ,略作停顿以后, 再按至第二停点 , 这样做可以确保吸头内无残留液体 。如果这样操作还有残留液体存在的话,您就应该考虑更换吸头了 。
6、卸掉吸头
卸掉的吸头一定不能和新吸头混放, 以免产生交叉污染。
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注意事项
1、吸有液体的移液枪不应平放,枪头内的液体很容易污染枪内部而可能导致枪的弹簧生锈。
2、移液枪在每次实验后应将刻度调至最大,让弹簧回复原型以延长移液枪的使用寿命。
3、吸取液体时一定要缓慢平稳地松开拇指,绝不允许突然松开,以防将溶液吸入过快而冲入取液器内腐蚀柱塞而造成漏气。
4、为获得较高的精度,吸头需预先吸取一次样品溶液,然后再正式移液,因为吸取血清蛋白质溶液或有机溶剂时,吸头内壁会残留一层“液膜”,造成排液量偏小而产生误差。
5、浓度和粘度大的液体,会产生误差,为消除其误差的补偿量,可由试验确定,补偿量可用调节旋钮改变读数窗的读数来进行设定。
6、可用分析天平称量所取纯水的重量并进行计算的方法,来校正取液器,1ml蒸馏水20℃时重0.9982g。
7、严禁吸取有强挥发性、强腐蚀性的液体(如浓酸、浓碱、有机物等)。